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人白細(xì)胞介素1β檢測原理

更新時間:2025-08-04點(diǎn)擊次數(shù):50

Solarbio ELISA試劑盒采用基于雙抗體夾心法的酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)。將抗人IL-1β單克隆抗體包被在酶標(biāo)板上;分別加入梯度稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品和預(yù)稀釋的樣本,標(biāo)準(zhǔn)品和樣本中的人IL-1β會與酶標(biāo)板上的包被抗體充分結(jié)合;洗板后加入生物素化抗人IL-1β抗體,該抗體會與板子上包被抗體捕獲的標(biāo)準(zhǔn)品和樣本中的人IL-1β發(fā)生特異性結(jié)合;洗板后加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的鏈霉親和素,生物素與鏈霉親和素會發(fā)生高強(qiáng)度的非共價結(jié)合;洗板后加入顯色劑底物TMB,若反應(yīng)孔中樣品存在不同濃度的人IL-1β,則HRP會使無色TMB變成不同深淺(正相關(guān))的藍(lán)色物質(zhì),加入終止液后反應(yīng)孔會變成黃色;最后,在λmax=450 nm(OD=450 nm)處測定反應(yīng)孔樣品吸光度(OD),樣本中的人IL-1β濃度與OD成正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線和四參數(shù)擬合軟件便可計算出樣本中人IL-1β的濃度。

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